金霉素檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗。往預先包被金霉素抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色,顏色的深淺和樣品中的金霉素呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

金霉素檢測試劑盒(定性)操作流程:
1、試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4°C。
2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50uL。
3、樣本孔中加入待測樣本50uL;空白孔不加。
4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100uL,用封板膜封住反應孔,37°C水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次。
6、每孔加入底物A.B各50uL,37°C避光孵育15min。
7、每孔加入終止液50uL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
金霉素檢測試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,結果乘以5才是樣本實際濃度。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作,所有液體組分使用前充分搖勻。